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2013/11/18
組織工程與再生醫學
細胞培養技術
細胞培養從醫院患者身上取下的組織(軟骨或硬骨)。
配製培養液的過程當中，人員手套、口罩、手術帽的穿戴，減少汙染的可能性，而且實驗用具也是經過消毒，移液器(pipette)更是如此。
在加入碳酸氫鈉(小蘇打)之後，培養液由橘轉紅，pH值仍接近中性，但希望落在7.2~7.4之間。
抗凍劑使用dimethyl sulfoxide, DMSO，防止細胞樣品，因低溫而損傷，並冰存於-196oC的液態氮中。
解凍則是快速解凍，將低溫樣品放入37oC的恆溫水浴。快速解凍可避免冰晶刺穿細胞膜而使細胞死亡。
以磷酸緩衝液沖洗，再使用胰蛋白酵素，使細胞從培養瓶上脫落並懸浮。
從光學顯微鏡(OM)下，利用九宮格計算細胞密度，推出細胞總數量。
細胞染劑使細胞在OM底下，更容易觀察。
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